葡萄糖旋光度测定的实验报告

1，了解旋光仪的结构和旋光度的测定原理。

2、掌握旋光仪的使用和具体的旋光计算方法。

预览要求

理解定义；了解影响因素；理解决心的意义；了解碳水化合物的变旋光度现象；思考在这个实验中如何保护旋光仪。

实验原理

当单束平面偏振光通过手征性物质时，其振动方向会发生变化，光的振动平面会发生一定角度的旋转，这种现象称为旋光。物质使偏振光的振动面发生旋转的性质称为旋光性，具有旋光性的物质称为旋光性或旋光性。许多天然有机物是旋光性的。因为旋光性物质可以使偏振光振动面向右旋转(顺时针，标为“+”)或向左旋转(逆时针，标为“-”)，所以旋光性物质可以分为右旋物质和左旋物质。

单色光源(通常是钠灯)发出的光，经过偏振棱镜(尼科尔棱镜)后，转换成平面偏振光(简称偏振光)。当偏振光穿过样品管中的旋光性物质时，振动平面旋转一定角度。调节校准过的检偏器(也是一个尼科尔棱镜)让偏振光通过，检偏器的旋转度数显示在刻度盘上，就是测得的样品的旋光度α。

仪器和试剂

旋光仪、洗瓶、橡胶滴管、滤纸；

蒸馏水，5%葡萄糖溶液，未知浓度的葡萄糖溶液。

实验内容

1.旋光仪的结构

旋光性可以用旋光仪测量。旋光仪有两种:一种是自动数字显示测量结果的自动旋光仪，另一种是通过目视标定获得结果的圆盘式旋光仪。

2.旋光度的测定

(1)样品溶液的制备

准确称取一定量的样品，在50毫升容量瓶中配制成溶液。通常，水、乙醇和氯仿可以用作溶剂。如果使用纯液体样品进行直接测试，只需在测定前测定其相对密度。

因为葡萄糖溶液有变旋现象，所以要提前24小时配制好待测葡萄糖溶液，以消除变旋现象，否则测定时读数会不稳定。

(2)预热

打开旋光仪电源开关，预热5 ~ 10分钟，待其完全发出钠黄光后观察使用。

(3)零点调整

在测定样品之前，必须用蒸馏水调整旋光仪的零点。清洁样品管后，用蒸馏水填充，使液面稍微突出喷嘴。将玻璃盖沿管口边缘轻轻推平，不要带气泡，拧紧螺帽(拧紧至水密，过紧，载玻片易产生应力，引起视野亮度变化，影响测定精度)。干燥样品管，将其放入旋光仪中，并盖上盖子。打开钠光，把刻度盘调到零左右，视场就会大于或小于零。如图10-3中的a和b所示。旋转粗、细手轮，使视场内三部分亮度一致，即零视场，如图10-3c所示。记下刻度盘读数，重复调零4~5次，取平均值。如果平均值不为零且有偏差值，则应在测量读数中减去或加上。

A.视野大于或小于零度b .视野c .视野小于或大于零度

(4)决心

样品测定和调零的方法相同。每次测量前，样品管必须用蒸馏水冲洗1~2次，再用少量待测液体润湿2 ~ 3次，以免受污物影响，然后装上样品进行测量。转动刻度盘，找到黑暗照明下亮度均匀的零度视野。如果读数为正，则为右撇子；读数为负，左旋。读数和零值之间的差异是测量温度时样品的旋光度。在测定过程中，记下样品的温度和样品管的长度。测定结束后，将样品管中的溶液倒出，用蒸馏水冲洗样品管，干燥后放好。

按上述方法测定5%葡萄糖溶液的旋光度4~5次，填入下表相应位置。然后测量未知浓度的葡萄糖溶液的旋光度4~5次，填入下表中相应的位置。

(5)数据记录和处理

根据表格中设计的项目进行相应的处理，最终求出未知浓度葡萄糖溶液的浓度。