盐析法提取口腔拭子dna的原理是什么?
盐析法快速提取口腔拭子DNA
朱伟峰罗大亚涂李霞解克敏万等
目的建立一种盐析法快速口腔拭子
植物基因组DNA的提取方法。方法用细胞裂解液和蛋白酶K消化口腔上皮细胞,然后用5 mol/L。
用NaCl沉淀蛋白质,用异丙醇沉淀DNA。最后,用70%乙醇洗涤获得的DNA,并溶解在Te (10 mmol/L Tris-HCl,1 mmol/L)中。
乙二胺四乙酸,pH
8.0).采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对TP53基因的rs1042522和CHRNA3基因进行分析。
Rs12910984位点进行分型。不同基因型样本的测序验证。结果单次口腔拭子提取的DNA量在0.68 ~ 2.56μg之间,D260/D280比值为0.65。
比值在1.77和1.94之间。经过PCR扩增和消化,10个样本的两个单核苷酸多态性被明确分型。限制性酶切结果与测序结果一致。结论本实验的结果如下
盐析法可以快速、简便、经济地从口腔拭子中获得高质量的基因组DNA。
作者:
南昌大学医学院生物化学与分子生物学系;